pas染色:pas染色法(periodic acid-schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘suan把糖类相邻两个碳上的---氧化成醛基,再用schiff试剂(碱性品红与亚liu---钠)和醛基反应使呈现紫红色。实验仪器和材料
无水---
二jia---
高碘suan
偏重---酸钠
碱性品红
苏mu素
中性树胶
实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二ija---ⅰ20min-二jia---ⅱ20min-无水---ⅰ10min-无水---ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。2、高碘suan溶液处理:切片入高碘suan溶液10min,流水冲洗5min。3、schiff试剂处理:切片入schiff试剂10min,流水冲洗5min。4、苏mu素染色:切片入苏mu素染液1min,流水冲洗5min。5、快速脱水:将切片依次放入95%酒精i 5min -95%酒精ii 5min-无水---ⅰ5min -无水---ⅱ5min -二jia---ⅰ5min -二甲benⅱ5min中脱水透明,将切片从二甲ben拿出来稍晾干,中性树胶封片。6、显微镜镜检,图像采集分析。
染色结果:糖原呈红色,细胞核蓝紫色。
注意事项
染色后标本应及早观察和记录,染色后标本保存8天后,将逐渐褪色,保存时间延长,褪色更为明显。
敲低效果验证方法:
rt-pcr
检测mrna,动物实验室,是否仍存在靶 mrna?或是否敲低成功?
这种方法非常灵敏,但无法准确预测蛋白质水平。
蛋白质印迹实验
使用抗ti来检测样品中的靶蛋白表达以及多种相关蛋白质表达,从而观察靶蛋白敲除对其它蛋白质的影响。
免yi细胞化学法
可检测是否存在敲低蛋白。
其优势在于利用双重染色法,可同时检查敲除对其它蛋白质表达的影响以及其它蛋白质在细胞中的位置。
什么是sirna ?
小干扰 rna (sirna) 是由 20-25 个核苷酸组成的双链 rna 分子,动物实验,在细胞中具有多种功能。在 rna 干扰 (rnai) 通路中,动物模型实验外包,sirna 通过与互补 mrna 分子杂交干扰基因表达。这种干扰会触发 mrna 降解,动物模型,进而抑制特定基因的基因表达。
sirna 于 1999 年由 david baulcomb 实验室shou次发现。2001 年,thomas tuschl 提出合成 sirna 会在哺乳动物细胞中--- rna 干扰 (rnai)。如今,专门设计用于与 rna 靶序列杂交并使其降解的“合成”sirna 寡核苷酸已被广泛用于---细胞 rnai。靶 mrna 的降解能够有效“敲除”相应蛋白质的表达。然后可研究分析靶蛋白浓度降低造成的影响。动物实验室-动物模型-英瀚斯生物科技(查看)由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司位于江苏省南京市栖霞区和燕路371号东南大学大学科技园科创楼a301。在市场经济的浪潮中拼博和发展,目前英瀚斯在技术合作中享有---的声誉。英瀚斯取得---商盟,标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。英瀚斯全体员工愿与各界有识之士共同发展,共创美好未来。
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