前lie腺素e2对大鼠巨噬细胞株nr8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2+10 nmol/l ep2受体抑zhi剂ah6809+10 nmol/l ep4受体抑zhi剂ah23848 处理的nr8383 细胞作为各实验组,选择未经pge2以及其特---受体抑zhi剂处理的nr8383 细胞作为对照组,采用western blot 和qpcr方法检测各组nr8383细胞内vegf蛋白以及mrna的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别---1huvecs,运用transwell 小室、matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,观察pge2调控巨噬细胞对huvec 迁移效应和成管能力的影响。
结果:随着nr8383 细胞培养液中加入pge2浓度增gao,其 vegf蛋白表达和vegf mrna的表达水平---升高(p<0.05);0.1 nmol/l、1 nmol/l pge2处理过的nr8383细胞培养上清液可以---增加huvec细胞形成的小管面积,形成小管面积随着pge2处理浓度的增加而增加(p<0.05);huvecs的迁移运动也随着pge2处理浓度的升高不同程度的增强,huvecs趋化的数量---升高(p<0.05);研究发现pge2特---的ep2/ep4 受体拮抗剂ah6809/ah23848,可以---抑制pge2 增强nr8383 细胞内vegf mrnas 表达的作用并且也---抑制pge2 增强 nr8383细胞促进huvecs成管和趋化能力的效应(p<0.05)。
营养---性gan硬化动物模型
(1)fu制方法 离乳雄性大鼠,每日喂食缺乏dan碱的低蛋白高脂肪饲料8~10g,连续2~3个月。该饲料用酪蛋白或大豆作为蛋白来源,实验外包选,另加蔗糖、猪油、---粉、盐和定量的l-胱酸而组成。造模过程中,每日观察动物的一般活动状况,每周称量动物体重,造模结束后抽取全血制备xue清、称取部分肝组织制备匀浆作生化检测,摘取一些qi官称重,换算成脏器系数,并对肝组织进行组织形态学检查。
(2)模型特点 造模1个月时,约有20%动物si亡,2个月时,动物体重增长停止,有fu水潴留、出血、---等现象出现,巨检可见典型的肝结节、脾肿大、腹shui潴留、yi腺肿大、gao丸萎缩等特有---,有的还出现shen硬化,光镜检查显示,造模初期,肝组织呈小结节性脂肪gan硬化,随着饲育时闯的延长,出现粗大的结节性或小叶性gan硬化。
(3)比较医学 膳食不平衡或特种营养素缺乏可以导致动物肝细胞病变。实验证明,实验外包找,长期喂食dan碱缺乏食物可诱发大鼠肝脂变、肝纤维化乃至gan硬化。本模型采用离乳大鼠是由于幼鼠在发育期阶段对dan碱的需求量较大,因dan碱缺乏造成对机体伤害的敏感性自然比成年动物---。但事实上,对dan碱缺乏的敏感性取决于体内dan碱氧化酶的含量。人类gan脏不含dan碱氧化酶,不存在dan碱缺乏问题,西安实验外包,所以此模型不适于在发病机制上进行人类相关---的研究。不过,该模型由于fu制周期长,饲料配制复杂,实验外包公司,花费大,现已少见有单用此方法造模者。此外,实验中使用雄性动物雄鼠是因为雄性动物在向gan硬化转化过程中比雌性动物更为均一。在饲料中混入微量的半胱氨酸具有促进gan硬化发展的作用。
动物实验的管理
在建设中要充分的、尽可能的直接体现管理规范,充分考虑人为原因或可能的人为失误、尽量避免人为出现可能因素的存在;在管理上要尽可能避免设施的不足或缺陷和可能出现的漏洞,使设施可能的规范管理或充分发挥设施潜在的可进行的规范管理。
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