(二)mcao模型制备的操作方法与步骤
1.线栓的制备 选用直径为0.26mm的钓鱼线，用锋利薄刀片将线身垂直截成5cm长的小段，用细砂纸打磨头端棱角，在体视镜下选出头端光滑钝圆、大小一致者。用记号笔在距线栓头端20mm处做一标记，将线栓浸泡消毒后晾干。术前置于无菌生理盐水中备用，线栓临用前浸蘸2.5×1000000u/l---钠。
2.术前动物准备 分笼饲养(室温20～23℃，湿度60％～70％)，明暗光照12h：12h，适应性饲养1～2d，并按实验动物使用的3r原则给予人道关怀。术前12h禁食，自由饮水。
神经功能评价和行为学评价主要用于反映脑缺血再灌注模型动物的神经行为表现和损伤程度，常用的方法有longa评分法、bederson评分法、zealander梯形迷宫法、morris水迷宫法等。脑血流测量主要用于监测动物的脑血流变化和再灌注效果，常用的方法有激光多普勒血流仪、核ci共振灌注成像等。脑组织染色主要用于观察动物的脑组织结构和病理变化，常用的方法有ttc染色、he染色、nissl染色等。生化指标检测主要用于测定动物的---或脑组织中的一些相关物质的含量和活性，如乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶、---醛等 。分子生物学检测主要用于分析动物的基因表达和蛋白质水平的变化，如rt-pcr、western blot、免yi组化等。
5.mcao操作中的注意事项 首先，在实验中需注意麻zui药wu的浓度和剂量，保持气道通畅。避免---气管，防止因分泌物过多而引起窒息si亡。其次，分离颈总动脉、颈内动脉和颈外动脉时一定要注意勿损伤迷走神经，大鼠脑缺血再灌注模型制作，并将血管周围的结缔组织剥离干净，为线栓插入做好准备。
同时注意勿伤及血管以防止大出血所致的si亡。cca上剪口是手术关键步骤之一，眼ke剪要锐利，剪口时剪刀与血管正上方约成60°角，剪口不宜太大，否则血管容易断裂造成实验失败。以不超过cca壁上1/4为宜，但也不宜太小，否则入线困难。
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