细胞培养中常见的污染及解决方法
支原体污染
支原体是隐蔽的污染物，不能通过过滤去除。显微镜下没有任何可见的支原体污染迹象，广安细胞，比如细胞病变和浊度或 ph 值变化（即使在---污染的培养基中），这样就会导致我们产生错误的---。而在牛中，支原体是常见的微生物之一。
解决方法：通常的过滤灭菌方法对支原体没有影响。细胞一旦被支原体污染，---是对重要的细胞系，必须去除支原体，一般的方法有、抗和抗与补体联合。值得注意的是，支原体很---的结构特征是没有细胞壁。因此，它对作用于细胞壁的生物合成（如 β-内---类、万古等）完全不敏感，并且通常对多粘菌素、---和类具有耐药性。相反，四环素类和大环内酯类对支原体的抑制作用很强，而---糖苷类和氯的抑制作用较弱。
3d细胞培养
3d多细胞肿liu球是在体外应用组织培养方法使肿liu细胞以多细胞集聚体的形式生长成为具有三维结构的球体。与传统的2d贴壁细胞培养模型相比，流式细胞检测结果分析，3d多细胞肿liu球可以通过模拟三维细胞网络、细胞与基质、细胞与细胞之间的相互作用，从而贴近肿liu组织中相应的病理生理特征。因此， 3d多细胞肿liu球培养模型已经逐渐应用于gan细胞培养和分化、ai症研究、yao物和毒性筛选及组织工程等特定应用中。虽然3d多细胞肿liu球模型具有更---的实体肿liu生理相关性，但是与2d贴壁细胞培养模型相比，获得大量相对统一的3d多细胞肿liu球模型需要-系列的培养过程和表征手段。
关于细胞培养的常见问题:
q: 细胞在培养过程中出现碎片如何处理？
a: 贴壁细胞在移除原培养液后，用 pbs 冲洗 2-3 遍；悬浮细胞离心移除原培养液后，加入 pbs 重悬，流式细胞技术，离心移除 pbs; 一般建议重复上述步骤 2-3 遍，用 800-1000rpm 离心 3-5 分钟。
q：细胞冻存能放在 -80℃ 保存吗？
a：长期保存的细胞应当放在液氮（-196℃）中保存，短时间（一般 1 周-2 周）可以存放在 -80℃。
q：培养瓶是用密封盖好，还是用透气盖好？
a：都可以。只是在使用密封盖培养瓶时，瓶盖旋至约 2/3，流式细胞，不要完全拧紧，预留约 1/3 以便细胞可以透气；有些品牌的密封盖培养瓶的瓶盖上有适合位置指示标志。
q:何谓 fbs，fcs，cs，hs?
a: fetal bovine serum(fbs)和 fetal calf serum(fcs)之间没有区别，都是指胎牛；fcs 不是正规命名，尽量不使用。calf serum（cs）则是指小牛。horse serum(hs)则是指马。
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