病理实验外包，病理染色fish染色介绍，荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization），透射电镜，简称fish。 是利用荧光标记的特异---探针与细胞内相应的靶dna分子或rna分子杂交，通过在荧光显微镜或共---激光扫描仪下观察荧光信号，来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布，或者是结合了荧光探针的dna区域或rna分子在染色体或其他细胞器中的定位。fish常使用的靶序列是16s rrna，根据rrna目标区域可设计寡核苷酸探针，进行种属特---鉴定；将处理好的样品置于荧光显微镜下，扫描电镜，选择分散较好的区域来观察。三色（或者更多）荧光激发下，观察到不同颜色的荧光图像。通常选用20x物镜来扫描样品杂交区域，40x或100x物镜下观察样品，从一定的方向进行计数，并对计数情况进行分析。南京英瀚斯，病理染色实验服务平台。
病理实验外包，病理染色常见染色介绍tunel染色：基因组dna断裂时，暴露的3’-oh可以在末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase， tdt) 的催化下加上荧光素 (fitc) 标记的dutp (fluorescein-dutp) ，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是tunel (tdt-mediated dutp nick-end labeling) 法检测细胞凋亡的原理。 实验步骤
使细胞或组织贴在载玻片上?固定?洗涤?通透?洗涤?预平衡?用荧光素12-dutp标记断裂的dna链?终止反应?洗涤?封片?分析样品南京英瀚斯，的病理染色实验服务平台。
病理实验外包，病理染色切片常见问题及解决方法：1.切片碎烂或组织脱出并与石蜡分离
●原因：组织脱水，透明不够。浸蜡时间过长、浸蜡温度过高。组织脱出是由于脱水、透明时间不够，或组织中含有---等，石蜡不易渗入组织中故导致石蜡与组织分离。二使用时间过久。
●解决方法：必须按组织大小厚薄选择脱水、透明时间。依组织的性质和结构特点确定浸蜡时间、控制包埋温度。一般这种情况难以补救。脱水，扫描电镜实验报告，透明渗蜡不够，应重新熔化，退回入二和酒精，再进行渗蜡包埋。更换二。
2.切片皱褶太多且不能完全展开
●原因：石蜡太软或室温过高。切片刀上粘有残余的石蜡，刀口不干净。组织浸蜡时间不够或脱水、透明不够。切片刀不锋利。
●解决方法：可将蜡块放入冰箱中冰冻后切片。并在切片时一边切片一边用冰块冰冻或换蜡。如室温过高，sem扫描电镜，可开空调降低室温。切片刀不干净，可用棉花沾少许二将刀口拭干净。组织浸蜡不够，可重复浸蜡过程。将切片刀磨锐利再行切片。南京英瀚斯，病理染色实验服务平台。
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